常用菌株

黄帮主

CJ236菌株：
缺乏 dUTPase(dut⁻)：导致细胞内dUTP积累，部分替代 dTTP 掺入 DNA：
缺乏尿嘧啶-N-糖苷酶(ung⁻)：无法切除 DNA 中的尿嘧啶（U），使 DNA 稳定保留 U。
在定点突变和单链DNA制备中具有重要作用，是获得ss-DNA模板的首选菌株。通过 CJ236 转化后富集的 ssDNA，可用于 Kunkel 法进行定点突变，是进行Kunkel定向诱变方法的首选菌株。
Kunkel诱导突变是将复制型的M13噬菌体转化到dut-，ung-菌株，如CJ236菌株中生长，尿嘧啶U被掺入到DNA链中，替换了原本的胸腺嘧啶T，从而生成了尿嘧啶单链DNA（dU ssDNA），然后使用引入突变的合成引物与dU ssDNA模板进行退火，延伸后产生了异源共价闭合环状双链DNA（CCC-dsDNA）。再将这个异源CCC-dsDNA转化到正常的菌株中（dut+，ung+），含有尿苷的模板链被破坏，新合成的带有突变碱基而不含尿苷核苷酸的新链得以保存下来，从而实现对DNA模板的多位点定点突变，这种方法明显提高了诱变效率，为基因工程和蛋白质工程的进一步研究和发展提供了有力的工具。