卡妥索单抗(Catumaxomab)

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卡妥索是一种三功能双特异性抗体，该抗体结合肿瘤细胞上的跨膜糖蛋白-上皮细胞粘附分子（EpCAM）和T细胞上的CD3，还通过FcγR结合募集免疫辅助细胞。通过T细胞和辅助细胞介导的细胞毒性杀死肿瘤细胞，并且由于独特的FcγR结合和激活特性，具有针对肿瘤细胞的长期疫苗潜力。

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在2009年获得EMA批准在欧洲上市治疗恶性腹水，是全球第一个上市的双特异性抗体，海外商品名为Removab。但是由于上市后表现欠佳，销售额过低，catumaxomab于2017年退市停产

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EpCAM，上皮细胞黏附分子，按白细胞分化抗原为CD326，属单次跨膜I型糖蛋白。
EpCAM基因长14 kbp，蛋白大小为39-40KDa，属于I型跨膜糖蛋白，分子结构由胞外结构域、单次跨膜结构域和胞内结构域3部分构成。
生理情况下，EpCAM表达于细胞间紧密连接处。而在肿瘤组织中，包括肺癌，结肠癌，胰腺癌，胆管癌，乳腺癌以及胚胎干细胞。EpCAM在细胞表面上广泛表达。EpCAM作为常见的高表达的上皮肿瘤相关抗原，介导钙非依赖型的同型上皮细胞间黏附的功能，在上皮组织肿瘤中的表达水平远远超过正常组织。

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EpCAM 的功能：
EpCAM参与调节细胞间黏附、迁移、增殖及信号传导。EpCAM的过表达可能导致Wnt-B-连环蛋白信号通路这一经典的肿瘤信号传导通路的激活，通过Wnt级联反应激活原癌基因e—myc和cyclin A／E的表达，诱导细胞的增殖，EpCAM 在一些恶性肿瘤中呈现过表达。

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Triomab quadroma技术
Trion Pharma公司
1995年授权专利 WO1995033844A1

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利用Protein A不结合大鼠抗体的原理，先剔除掉重链为大鼠源的抗体，挂在Protein A柱上的抗体，pH=3.5的洗脱液可以将小鼠母本抗体洗脱掉，pH=5.8的洗脱液可以将双特异性抗体洗脱掉，从而有效分离得到纯度较高的双特异性抗体。

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catumaxomab (Removab)

It was developed as a trifunctional bsAb consisting of a tumor antigen and CD3-binding hybrid of murine IgG2a and rat IgG2b. It targets the tumor via EpCAM, recruits T effector cells via binding to CD3 of the T cell receptor complex, and also activates monocytes，macrophages, dendritic cells, andNK cells by Fcγ-receptor binding .This induces the killing of tumor cells in patients with ovarian carcinoma and leads to the prevention of ascites.
三功能抗体，拥有两个不同的Fab段，分别靶向肿瘤抗原和靶向免疫细胞（分子）的CD3ε，为免疫细胞和癌细胞搭建桥梁，激发具有导向性的免疫反应。
同时抗体的Fc段还能通过Fcγ受体结合募集免疫辅助细胞，激活单核细胞、巨噬细胞、星状细胞以及NK细胞，具有针对肿瘤细胞的长期疫苗潜力。

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三功能抗体和单抗的比较

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进入临床的三种Trion Triomab 技术制备的抗体。

第一种抗体是Catumaxomab (Removab)。

第二种进入临床的是ertumaxomab, 两个Fab分子分别结合CD3和HER2/NEU，用于乳腺癌和HER2阳性的进展性实体瘤的治疗。

第三种同类技术抗体是FBT-A05, 分别结合CD3和CD20。

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卡妥索单抗（Removab）由靶向EpCAM的鼠IgG2a，靶向CD3的大鼠IgG2b和募集不同免疫效应细胞的Fc片段组成。通过将FaDu细胞系（HNSCC）的肿瘤球状体与外周血单核细胞（PBMC）共培养来评估卡妥索单抗的三重功能。结果表明，卡妥索单抗的三个功能部分对于整个抗肿瘤活性是必需的。